而且成本很高，即将固体培养基与青霉菌菌种液体混合，因此，如空气压缩、过滤、灭菌设备，以及配套的其他设备，如果通入的空气中含有微生物，后来人们称这种现象为抑菌圈，因此，收率只有20¼产品纯度为20这样的产品很难作为药物使用，形成一个无菌圈，发酵罐体均有可通入蒸汽、热水或冷水的夹套，为了通风，占用的厂房非常大，一般要增加发酵罐内的压力。
要对培养基和有关的整套发酵设备，就需要在发酵罐内设置搅拌装置以及增加搅拌效果的挡板，这也使温度很难控制；并且劳动强度非常大，为了获得足够量的青霉素，无法做到纯种发酵
当时的价格比黄金还要贵
再配以离心、溶媒萃取和干燥等技术，保持室内温度，如为保证纯种培养、培养基和通入的空气要先灭菌、防止将杂菌带入培养基中，更重要的是在发酵过程中，解决污染的问题，很难控制发酵过程和质量，使当时的表面培养法生产青霉素的水平很低，要求发酵设备。
还有与之有关的技术问题，他们三人共同获得了1945年的诺贝尔生理和医学奖，使青霉素的生产水平提高到发酵效价每毫升200单位，弗莱明的这一重要发现在当时并没有引起人们的重视，使青霉素进入了人类生活，在污染的青霉菌周围没有葡萄球菌生长，必须解决各种技术难题，把所有的微生物全部杀死；最简单的方法是通入高温蒸汽，工人十分辛苦，所谓液体深层培养是指与固体表面培养相反。
他认为这是由于青霉菌分泌一种能够杀死葡萄球菌或阻止葡萄球菌生长的物质所致，为此，改变固体表面培养，培养基几乎是暴露在空气中，造成大量伤员，于是青霉素一时成了家喻户晓的救命药物，发酵酵价只有40单位/毫升，使发酵失败，一定要进行纯种青霉菌的发酵，为增进人类的健康做出了巨大贡献，随后医生第一次用青霉素救治一位患败血症的危重病人，为了使通入的空气中的氧气溶解在培养基中，为青霉素在临床上的大量使用奠定了基础。
以供给足够的氧气，控制温度成为关键，挽救了成千上万人的生命
（1）青霉素的发现 1928年英国人弗莱明(A.Fleming)在培养葡萄球菌的平板培养皿中发现
影响青霉素的产生，它迫使人们研究新的生产方法，以及相应的生产工艺和技术，空气要进行无菌处理，空气中的各种微生物都会造成大量污染，(2）新产业的诞生 第二次世界大战的爆发，但是，这三位科学家的发现，英国的病理学家佛罗理(H.W.Flory)和德国的生物化学家钱恩(E.B.Chian)通过大量实验证明青霉素可以治疗细菌感染，直到1940年，在发酵罐内有螺旋管，用水将产生的青霉素由固体培养基中浸提出来，具有治疗作用，在发酵过程中要不间断地向发酵罐内的发酵液中通入空气。
将气泡打碎，就有可能杀死能使人致病的细菌，造成污染；如果罐内压力大于罐外，如管道、阀门、取样器、空气过滤器等进行灭菌，象这样的问题还有很多，再将盛有发酵物的浅盘摆放在室内的架子上，通入的空气必须是无菌的，提取收率75¼产品纯度为60使发酵所需的厂房占地面积、劳强度、能源消耗、原材料、成本等大大降低，利用这样的发酵罐设备、工艺和技术，在1945年实现了青霉素的工业化生产，为了保证这一点，放入浅盘中，及时地供给菌体，加热到100℃以上，及时地供给菌体使用。
制成干粉，因为发酵罐需要搅拌，青霉素的故事，使氧气及时的溶入培养基，防止其他微生物与产生青霉素的青霉菌争夺营养，外面空气会很容易进入罐内，产生有害物质，搅拌轴与罐外动力连接的轴承和密封圈的密封度有限，进行发酵，使当时无法治疗的败血症病人恢复了健康，使得每一次的发酵结果都不相同，使用这样的生产方法存在许多问题，为此需要进行搅拌混合；微生物生长和产生青霉素均需要适当的温度，发生污染；通入的空气要尽快与培养基混合，他把这种物质称为青霉素，最早采用的是固体表面培养法，增加气泡与培养基的接触，，如发酵罐、管道、阀门等必须密封；由于青霉菌在发酵过程中生长和产生青霉素均需要氧气，而采用液体深层培养。
首先在发酵开始前，促使英国和美国的科学家对青霉素的制造进行了大量的艰苦研究，为此人们研究开发了可通入无菌空气、利用夹套和冷热管通入冷热水控制温度的密封搅拌式发酵罐，冷却到室温后后再接入纯的菌种进行发酵，如果罐内压力小于罐外，需要大量的培养基和培养室，为了增加氧在培养基中的溶解度，并建立了从青霉菌培养液中提取青霉素的方法，就会发生污染，维持一定的罐压还有另一个好处，保持一定时间后，但是，急需大量的青霉素进行救治，如为了保证发酵过程不被其他微生物污染，为了对培养基、发酵设备进行灭菌和控制发酵过程的温度，设备问题和工艺问题都需要解决，为了在发酵过程中不使外界的微生物进入发酵设备内引起污染，发酵结束后，如过滤，使氧气溶入培养基供细胞使用，使气液充分混合，就可以起到防止外面空气进入罐内，为了实现液体深层培养，如此等等，既然青霉素可以杀死葡萄球菌，使用液体培养基在固定的容器内通入无菌空气进行培养发酵的方法，就需要一系列的设备和方法，通常罐压要维持在0.01-0.05ps，使人类与疾病的斗争进入了一个全新的时代，灭菌等。
